La facility di Protein Technology del DiCIBIO offre la sua esperienza nelle tecnologie di proteine ricombinanti e nella biochimica di proteine. Offriamo supporto, training, maeriali e gli strumenti per la produzione e la purificazione di proteine e per la loro caratterizzazione.
Servizi
Gli utenti si possono interfacciare con noi in diverse modalità. Ricercatori esperti nella chimica delle proteine possono utilizzare della facility come un'estensione del loro laboratorio, qui troveranno tutto il necessario per la loro ricerca. Possiamo anche offrire training e supervisione agli utenti che necessitano di aiuto in uno o più passaggi dei protocolli di purificazione. Inoltre, siamo in gradi di offrire pacchetti di purificazione standardizzati o personalizzati. Il nostro goal principale è quello di aiutare gli utenti con la progettazione e l’implementazione di ogni passaggio di purificazione, che potrà essere effettuato in collaborazione con la facility o indipendentemente. Sono anche disponibili servizi di purificazione completi effettuati da personale della facility per proteine ben caratterizzate.
La facility ha un a grande varietà di ceppi di E coli e vettori per l’ espressione. Test di espressione e purufcazioni su media-larga scala possono essere condotte a differenti temperatore e in mezzi minimi arricchiti con differenti isotopi (5N, 13C, o selenometionina).
Possiamo fornire aiuto anche nella progettazioen e nel disegno di costrutti e vettori di espressione o mutazioni con metodi tradizionli di mutagenesi o tecniche avanzate di biologia sintetica.
Infine, il nostro personale mette a disposizione la sua competenza nella coniugazione di proteine purificate con fluorofori o piccole molecole.
La facility è attrezzata con cromatografi FPLC e un largo assortimento di colonne cromatografiche. Abbiamo anche un ampia gamma di resine e, colonne per protocolli di purificazione per gravità e i materiali necessari per la dialisi, la concentrazione e la quantificazione di proteine.
Offriamo anche la nostra esperienza nelle interazioni tra proteina e proteina e proteine-acidi nucleici e nel disegno e l’analisi di esperimenti per la caratterizzazione di tali interazioni tramite tecniche di FRET, fluorescenza polarizzata e calorimetria.
Strumentazione
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AKTA Pure e AKTA Purifier (Cytiva)
Questi due cromatografi possono essere utilizzati per purificazioni analitiche o preparative utilizzando un ampio pacchetto di colonne cromatografiche disponibili nel laboratorio o personali. Gli utenti possono accedere all’utilizzo di questi FPLC in maniera indipendente dopo aver ricevuto un training. -
Microcal Peaq-ITC (Malvern)
La tecnica ITC (isotermal titration calorimetry) può essere utilizzata per misurare costanti di dissocaizione, parametri stechiometrici e termodinamici di un interazione biomolecolare nell’intervallo di misura da nano molare a micro molare. -
Dynamic Light Scattering Zetasizer Nano ZS (Malvern)
Questo strumento può essere utilizzato per analizzare la distribuzione di dimensione, peso molecolare e potenziale zetadi proteine e nanoparticelle. Può anche essere utilizzato come rivelatore, combinato con misure di UV-vis, del nuovo AKTA pure 25, per analisi cromatografiche ad esclusione di massa. -
Quantamaster Spectrofluorimeter (PTI)
Per ogni misura basata su molecole fluorescenti e per lo studio di interazioni macromolecolari con tecniche di FRET, fluorescenza polarizzata e misure di cinetica. Il nostro strumento può anche essere equipaggiato con un accessorio per misure di stopped-flow per la miscelazione rapida di campioni durante misure di cinetica. -
Typhoon 5 (Cytiva) laser scanner
Per l’acquisizione di immagini e la quantificazione precisa di molecole fluorescenti, colorimetriche e radiolabellate. -
Thermoshakers
Diversi termoshaker sono disponibili per l’espressione su larga scala di proteine ricombinanti a temperature che vanno da 4 a 37 C.